食品硪究与开发 检测分析 ＤＯＩ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１００５－６５２１．２０１３．０６．０２４ Ｆｏｏｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ２０１３年３月 第３４卷第６期 ８５ ＨＰＬ Ｃ测定小粒种咖啡 不同部位咖啡因含量 韩洪波 ．一，杨春琳 ，李敏杰ｌＩ （１．攀枝花学院生物与化学工程学院，四川攀枝花６１７０００；２．攀枝花市干热河谷特色生物资源工程技 术中心，四川攀枝花６１７０００） 摘要：利用ＲＰ—ＨＰＬＣ测定小粒种咖啡不同部位（咖啡豆种仁、果皮和茎叶）中咖啡因含量。色谱柱：ＡｇｉｌｅｎｔＥｃｌｉｐｓ ＸＤＢ—Ｃ１８（Ｓｕｎ，４．６ｍｍｘｌ５０ｍｍ）；流动相：甲醇一水（３０：７０，体积比）；流速：１ ｎｌＬ／ｍｉｎ；检测波长：２８０ ｎｍ；柱温为３０℃； 咖啡因标准曲线方程为：Ｙ＝ｌ１．５６６ ２Ｘ＋２．９８２ ７，Ｒ ＝ｌ。咖啡因在１６ ｍＬ～８０ ｔｘｇ／ｍＬ范围内具有良好的线性关系。测 定出攀枝花本地引种的小粒种咖啡豆中咖啡因含量为１５ ５６ ｇ／ｋｇ，果皮中含量为１３．６２ ｇ／ｋｇ，茎叶中的含量为２１．１９ 。精密度实验结果为咖啡豆种仁、果皮和茎叶中含量的ＲＳＤ分别为１．０１％、１．１１％、１．５９％；重复性实验结果为咖啡 豆种仁、果皮和茎叶中咖啡因含量的ＲＳＤ分别为０．６９％、１．７９％、１－３８％；均小于２％，达到含量测定要求。咖啡豆种 仁、果皮和茎叶中咖啡因回收率分别在９５．６％～１０８．４％，９４％～１０３．４％，９６．５％～１０２．６％。 关键词：ＲＰ－ＨＰＬＣ；咖啡豆种仁；咖啡豆果皮；咖啡茎叶；咖啡因 Ｔｈｅ Ｃａｆｆｅｉｎｅ Ｃｏｎｔｅｎｔ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｉｎ Ｄｉｆｅｒｅｎｔ Ｐａｒｔｓ ｏｆ Ａｒａｂｉｃａ Ｃｏｆｆｅｅ ｂｙ ＨＰＬＣ ＨＡＮ Ｈｏｎｇ—ｂｏ ，ＹＡＮＧ Ｃｈｕｎ－ｌｉｎ ，ＬＩ Ｍｉｎ－ｊｉｅ ’ （１．Ｂｉｏｌｏｇｙ＆Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐａｎｚｈｉｈｕａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｐａｎｚｈｉｈｕａ ６１７０００，Ｓｉｃｈｕａｎ，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｔｈｅ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ｏｆ Ｐａｎｚｈｉｈｕａ Ｄｒｙ—ｈｏｔ ｖａｌｌｅｙ．Ｐａｎｚｈｉｈｕａ ６１７０００，Ｓｉｃｈｕａｎ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＲＰ—ＨＰＬＣ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐａｒｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ａｒａｂｉｃａ ＣＯｆｌｅｅ（ｃｏｆｆｅｅ ｓｅｅｄ ｋｅｒｎｅｌ，ｐｅｅｌ，ｓｔｅｍｓ ａｎｄ ｌｅａｖｅｓ）ｉｎ ｔｈｅ ｃａｆｆｅｉｎｅ ｃｏｎｔｅｎｔ．Ｃｏｌｕｍｎ：Ａｇｉｌｅｎｔ Ｅｃｌｉｐｓ ＸＤＢ－Ｃ１８（Ｓｕｎ，４．６ ｍｍ ｘ１５０ ｍｍ）；ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ： ｍｅｔｈａｎｏｌ－ｗａｔｅｒ（３０＃０，ＶⅣ）；ｆｌｏｗｒａｔｅ：ｌｍＬ／ｍｉｎ；ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ：２８０Ｂｉｎ；ｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ３０℃； Ｃａｆｆｅｉｎｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｃｕｒｖｅ ｅｑｕａｔｉｏｎ：Ｙ＝Ｉ １．５６６ ２Ｘ＋２．９８２ ７，Ｒ２＝１．Ｃａｆｆｅｉｎｅ ｉｎ １６ ｇ．／ｌｎＬ一８０ ｐ￣ｇ／ｍＬ ｒａｎｇｅ ｗｉｔｈ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒｉｔｙ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｌｏｃａｌ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ａｒａｂｉｃａ Ｃｏｆｆｅｅ Ｐａｎｚｈｉｈｕａ ｃａｆｆｅｉｎｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｃｏｆ＿ｆｅｅ ｂｅａｎｓ １５．５６ ｇ ｇ，ｐｅｅｌ ｃｏｎｔｅｎｔ １３．６２ ｇＣｋｇ，ｓｔｅｍｓ ａｎｄ ｌｅａｖｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ２１．１９ ｇ／ｋｇ．Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｃｏｆｆｅｅ ｓｅｅｄｓ，ｐｅｅｌ，ｓｔｅｍｓ ａｎｄ ｌｅａｖｅｓ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆｔｈｅ ＲＳＤ ｗｅｒｅ １．０１％，１．１１％，１－５９％；Ｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｒ ｆｔｈｅ ｃｏｆｆｅｅ ｓｅｅｄｓ，ｐｅｅｌ，ｓｔｅｍｓａｎｄｌｅａｖｅｓ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｉｎｃａｆｆｅｉｎｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＲＳＤ０．６９％，１．７９％，１．３８％；ｗｅｒｅｌｅｓｓｔｈａｎ２％， ａｃｈｉｅｖｅ ａｓｓａｙｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ￣Ｃｏｆｆｅｅ ｓｅｅｄｓ，ｐｅｅｌ，ｓｔｅｍｓａｎｄｌｅａｖｅｓｏｆｃａｆｆｅｉｎｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｗｅｒｅ９５．６％一１０８．４％，９４％一 １０３．４％．９６．５％－１０２．６％． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ＲＰ－ＨＰＬＣ；ｃｏｆｆｅｅ ｓｅｅｄ ｋｅｒｎｅｌ；ｃｏｆｆｅｅ ｐｅｒｉｃａｒｐ；ｃｏｆｆｅｅ ｓｔｅｍｓ ａｎｄ ｌｅａｖｅｓ；ｃａｆｆｅｉｎｅ 咖啡因（ｃａｆｆｅｉｎｅ）又称咖啡碱，别名茶素，属生物 碱类化合物，化学名为１，３，７一三甲基一２，６一二氧嘌呤， 基金项目：《优质小粒种咖啡蓝山及墨西哥１ １等引种示范》攀枝花市 常见的有水合咖啡因和无水咖啡因两种，无水咖啡因 分子式为ｃ Ｈ 。Ｎ４０：（其分子量为１９４．１９），结构式见 图１。 科技项目（项目计划编号：２００８ＣＹ—Ｓ一４） 水合咖啡因为白色有丝光的柔韧性长针状结晶 体，无臭，味苦，长期露置于空气中有风化性，加热到 １００℃时失去结晶水，并有升华现象，加热到１２０℃时 作者简介：韩洪波（１９８１一），男（汉），讲师，硕士，研究方向：天然产物 分离分析。 韩洪波，等：ＨＰＬＣ￣￥４定小粒种咖啡不同部位咖啡因含量 检测分析 ８６ １．２标准溶液与样品液的配制 Ｏ ｛ Ｎ １．２．１标准溶液的配制 用电子分析天平精确称取咖啡因标准品４０ ｍｇ， 将其移入５０ ｍＬ的容量瓶中，并用蒸馏水定容，即配得 ／＞ 咖啡因标准品母液（８ｏｏ￣ｇ，／ｍＬ）。再用移液管精确移取 １、２、３、４、５ ｍＬ的母液，分别移人５０ ｍＬ的容量瓶中， 并用蒸馏水定容，即得到浓度为１６、３２、４８、６４、 ８０ Ｉｘｇ／ｍＬ的标准品溶液。 图１咖啡因的化学结构式 Ｆｉｇ．１ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｏｆ ｃａｆｆｅｉｎｅ １．２．２样品稀释液的配制 将咖啡豆分为咖啡豆果皮和种仁两部分，而咖啡 茎叶将其剪成小块，处理好的样品材料放入恒温干燥 显著升华。无水咖啡因为白色粉末，熔点为２３５ ｃ《＝～ ２３８ ，是弱碱性物质，易溶于热水、氯仿、冷乙醇和丙 酮，难溶于乙醚和苯，升华温度为１７８ ｃｃ～１７９ ｏＣ。近些 箱中，５５ ｃｃ条件下，烘干，再将种仁、果皮以及茎叶粉 碎，过０．４５ ｍｍ的分样筛。分别精确称取样品１．０ ｇ于 ５０ ｍＬ的锥形瓶中，加入０．５ ｇ氧化镁，再加入３０ ｍＬ 蒸馏水，在沸水浴中浸提２０ ｍｉｎ，每隔５分钟振荡一 次，然后立即进行减压过滤，滤液冷却至室温后移入 ５０ ｍＬ的容量瓶中，并用蒸馏水定容，稀释ｌ０倍后 待测。 １－３色谱条件 色谱柱：Ａｇｉｌｅｎｔ Ｅｃｌｉｐｓ ＸＤＢ—Ｃ１８（Ｓｕｎ，４．６ ｍｍＸ １５０ ｍｍ）；流动相：甲醇一水（３０：７０，体积比）；流速： １ ｍＬ／ｍｉｎ；检测波长：２８０ ｎｍ；柱温为３０℃。 １．４标准曲线的绘制 取配制的标品溶液，按浓度梯度，由低到高，依次 取１Ｏ 标品溶液进柱测定。 １．５样品液的测定 年研究表明，咖啡因对神经系统、心脑血管系统、消化 系统、肿瘤化疗的生化调节、神经官能症和偏头痛等 均有一些积极作用 。 目前测定咖啡因的方法较多，如薄层色谱法、碘 量法、高效液相色谱法、重量法、分子印迹毛细管整体 柱液相色谱法和紫外分光光度法等［５－６／。采用反相高效 液相色谱法测定攀枝花本地引种的小粒种咖啡不同 部位咖啡因的含量，具有快速、准确、处理简便的特点。 １材料与方法 １．１材料、试剂与仪器 咖啡：采自攀枝花市干热河谷特色生物资源种植 基地；咖啡因标准品（纯度大于９９．９％）：国药集团上 海化学试剂公司；ＣＨ，ＯＨ（ＡＲ）、氧化镁（ＡＲ）：成都市 科龙试剂化工厂；ＪＹＬ一３５０Ａ九阳理料机：九阳股份有 分别对咖啡豆种仁、果皮和茎叶样品液进行测 定，每种做６个平行样，每个平行样测定６次。记录色 谱图，计算其含量。 １．６咖啡因含量计算方法 样品中咖啡因含量以１ ｋｇ干物质所含的克数表 限公司；安捷伦１２００高效液相色谱仪：安捷伦科技有 限公司；ＦＡ２１０４Ｓ电子分析天平：上海恒平科学仪器有 限公司；ＤＬ一１电子万用炉：北京市光明医疗仪器厂； ＳＨＺ—Ｄ（Ｉｌ１）循环水真空泵：天津华鑫仪器厂。 咖啡因含量（ ＝ 示，具体计算公式如下： 体积Ｖ（ｍＬ）×１０ ×１０－３ 式中：Ｃ为样品溶液或稀释液浓度，可由咖啡因标 准曲线计算，设咖啡因标准曲线方程为：Ｙ＝ＡＸ＋Ｂ，样 品稀释液浓度Ｃ＝（Ｙ－Ｂ）／Ａ；ａ为稀释倍数，１０；Ｖ为５０ ｍＬ； Ａ由称量数据知。 埴 鲨 ２结果与分析 ２．１标准曲线的绘制 以峰面积积分值ｙ为纵坐标，标准溶液浓度 标品浓度／（Ｉ．Ｌｇ／ｍＬ） 图２咖啡因标准曲线 Ｆｉｇ．２ Ｓｔａｎｄａｒｄ ｃｕｒｖｅ ｏｆ ｃａｆｆｅｉｎｅ Ｘ（Ｉｘｇ／ｍＬ）为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程，咖 啡因标准曲线见图２。 检测分析 韩洪波，等：ＨＰＬＣ￣ 定小粒种咖啡不同部位咖啡因含量 其线性回归方程为：Ｙ＝Ｉ１．５６６ ２Ｘ＋２．９８２ ７，Ｒ ＝ｌ。 结果表明，咖啡因在１６￣ｇ／ｍＬ～８０ Ｉ￣ｇ／ｍＬ范围内具有 良好的线性关系。 ２．２精密度与重复性实验 取其中一个咖啡豆种仁样品液，精确吸取１０ ， 重复进样６次，咖啡因含量的ＲＳＤ为１．０１％，种仁精 密度试验结果见表１。 表ｌ咖啡豆种仁精密度试验结果 Ｔａｂｌｅ １ Ｔｈｅ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｃｏｆｆｅｅ ｓｅｅｄ ｋｅｒｎｅｌ 取６个平行咖啡种仁样品液，对每组样品液重复 进样６次，并计算出该组咖啡因含量平均值，结果如 下。咖啡因含量的ＲＳＤ为０．６９％，种仁重复性实验结 果见表２。 表２咖啡豆种仁重复性实验结果 Ｔａｂｌｅ ２ Ｔｈｅ ｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ ｔｅｓｔ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｃｏｆｆｅｅ ｓｅｅｄ ｋｅｒｎｅｌ 取其中一个咖啡豆果皮样品液，精确吸取１０ Ｌ， 重复进样６次，测含量，咖啡因含量的ＲＳＤ为１．１１％， 果皮精密度试验结果见表３。 表３咖啡豆果皮精密度试验结果 Ｔａｂｌｅ ３ Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｃｏｆｆｅ ｐｅｒｉｃａｒｐ 取６个平行咖啡种仁样品液，对每组样品稀释液 重复进样６次，并计算出该组咖啡因含量平均值，结果 ７ 如下。咖啡因含量的ＲＳＤ为１．７９％，果皮重复性实验 结果见表４。 表４咖啡豆果皮重复性实验结果 Ｔａｂｌｅ ４ Ｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ ｔｅｓｔ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｃｏｆｆｅｅ ｐｅｒｉｃａｒｐ 取其中一个咖啡茎叶样品液，精确吸取ｌ０ ，重 复进样６次，测含量，咖啡因含量的ＲＳＤ为１．５９％，茎 叶精密度实验结果见表５。 表５咖啡茎叶精密度实验结果 Ｔａｂｌｅ ５ Ｔｈｅ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｃｏｆｆｅｅ ｓｔｅｍｓ ａｎｄ ｌｅａｖｅｓ 取６个平行咖啡种仁样品液，对每组样品稀释液 重复进样６次，并计算出该组咖啡因含量平均值，结果 如下。咖啡因含量的ＲＳＤ为１．３８％，茎叶精密度实验 结果见表６。 表６咖啡茎叶精密度实验结果 Ｔａｂｌｅ ６ Ｔｈｅ ｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ ｔｅｓｔ ｒｅｓｕｌｓｔ ｏｆ ｃｏｆｆｅ ｓｔｅｍｓ ａｎｄ ｌｅａｖｅｓ ２．３回收率实验 精密称取１．０ ｇ样品，按照上述方法处理，分别精 确加入相应的咖啡因标准品的溶液，测定该方法的回 收率。咖啡豆种仁、果皮和茎叶中咖啡因回收率分别 在９５．６％～１０８．４％，９４％一１０３．４％，９６．５％～１０２．６％。 ３结论 攀枝花本地引种的小粒种咖啡豆中咖啡因含量 韩洪波，等：ＨＰＬＣ￣４定小粒种咖啡不同部位咖啡因含量 为１５．５６ ｇ／ｋｇ，果皮中含量为１３．６２ ｇ／ｋｇ，茎叶中的含量 参考文献： 检测分析 为２１．１９ ｇ／ｋｓ。精密度实验咖啡豆种仁、果皮和茎叶中 含量的ＲＳＤ分别为１．０１％、１．１１％、１．５９％；重复性实 验咖啡豆种仁、果皮和茎叶中咖啡因含量的ＲＳＤ分别 为０．６９％、１．７９％、１．３８％；均小于２％，达到含量测定 【ｌ】赵灵芝，苏兴文，银巍，等．咖啡因对苯妥英诱导的小脑颗粒神经 元凋亡的保护作用及机制 ．中国药理学通报，２００４，２０（１２）： １３７０－１３７４ ［２］贾桂燕．咖啡降血糖活性的研究【Ｄ】．吉林：吉林农业大学，２００５：９— １２ 要求。咖啡豆种仁、果皮和茎叶中咖啡因回收率分别 在９５．６％～１０８．４％，９４％一１０３．４％，９６．５％一１０２．６％，说 ［３］丁发银，马海红．长期大量吸食咖啡因对消化性溃疡常规治疗影 响的观察［Ｊ］．长治医学院学报，１９９９，１３（４）：２６１ 明样品处理方法合理。参考其他咖啡中咖啡因含量测 定文献显示，阿拉比卡种咖啡豆的咖啡因含量在１５ ｇ／ｋｓ ［４］范镜林，杨劲松，李鼎，等．皮下埋植式动脉介入联合咖啡因治疗 恶性骨肿瘤１４例分析［Ｊ】＿中国肿瘤Ｉ晦床与康复，２００５，１２（３）： ２６３—２６４ 左右，与本文测定数据相当。本研究采用ＨＰＬＣ法测定 小粒种咖啡中不同部位咖啡因含量实验数据准确 可靠。 【５］５ 徐学笛．高效液相色谱法测定咖啡因含量的研究与探讨【ＪＪ．科技 成果纵横，２００８（２）：６０—６１ ［６】成洪达，邢占芬，李彤，等．温度对高效液相色谱分离选择性的影 响ｆＪ］．福建分析测试，２００９，１８（１）：１６—１９ 茎的生长时间比较长，所以茎叶混合物含量比豆 和果皮含量高。大规模的咖啡种植中，我们可以考虑 将茎叶和咖啡豆加工中剩下果皮等材料商业化提纯 咖啡因。 ［７］黄和，程学梅，叶英．ＧＢ／Ｔ １９１８２—２００３／ＩＳＯ １００９５：１９９２咖啡一咖啡 因含量的测定一高效液相色谱法［ｓ］．北京：国家质量监督检验检 疫总局，２００３ 收稿日期：２０１２—０６—３１ （上接第８４页） ２．７稳定性实验 芦丁、槲皮素和异鼠李素的加样平均回收率分别 为９９．３４％，９９．８２％和９８．９０％，ＲＳＤ分别为１．４２％， ２－２７％和２．４４％。 取同一供试品，分别在１、２、３、４、５ ｈ进样，结果芦 丁、槲皮素和异鼠李素峰面积的ＲＳＤ分别为１．８２％、 ２．３６％、２．５３％。说明供试品溶液在５ ｈ内稳定。 ２．８重复性实验 取骏枣样品３份，按２．３供试品溶液制备，测得芦 ３结论 本实验采用ＨＰＬＣ法测定骏枣果肉中芦丁、槲皮 丁、槲皮素和异鼠李素含量平均值分别为２０５．６ ｇ，ｇ， ８．７ Ｉ￣ｇ／ｇ，１７１．０ Ｉ－ｔｇ／ｇ。芦丁、槲皮素和异鼠李素峰面积 的ＲＳＤ分别为２．２４％，１．４４％和２．４８％。 ２．９加样回收率实验 素和异鼠李素的含量，实验结果表明：骏枣中芦丁、槲 皮素和异鼠李素含量分别为２０５．６、８．７、１７１．０ Ｉｘｇ／ｇ，平 均回收率分别为９９．３４％、９９．８２％、９８．９０％。该法具有 回收率高、重现性好等特点，结果准确，适于骏枣果肉 中芦丁、槲皮素和异鼠李素含量的测定。 参考文献： ［１］ＬＩ Ｊ，ＦＡＮ Ｌ，ＤＩＮＧ ｓ，ｅｔ ａ１．Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｉｆｖｅ ｃｕｈｉｖａｒｓ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｊｕｊｕｂｅ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ，２００７，１０３：４５４－４６０ ［２］ ＳＡＮ Ｂ，Ｙ１ＬＤＩＲＩＭ ＡＮ．Ｐｈｅｎｏｌｉｃ，ａｌｐｈａｔｏｃｏｐｈｅｒｏｌ，ｂｅｔａ－ｃａｒｏｔｅｎｅ 精密量取已知含量样品液３份，准确加入一定量 的对照品溶液，按２．１色谱条件测定，计算加样回收 率，结果见表２。 表２芦丁、槲皮素和异鼠李素的加样回收率 Ｔａｂｌｅ ２ Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅ ｏｆＲｕｔｉｎ，Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ａｎｄ Ｉｓｏｒｈａｍｎｅｔｉｎ ｓｔａｎｄａｒｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｆｏｕｒ ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ ｊｕｊｕｂｅ（Ｚｉｚｉｐｈｕｓ ｊｕｊｕｂａ Ｍｉｌｌｅｒ）ｓｅｌｅｃｔｉｏｎｓ【Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｆｏｏｄ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎａｌｙｓｉｓ，２０１０， ２３：７０６—７１０ 【３］黄锁义，覃成箭，余美科，等．益母草黄酮的提取及鉴别【Ｊ］．时珍 国医国药，２００５，１６（５）：３９８—３９９ ｆ４１李红，郅洁，马彦梅，等．沙枣黄酮的提取及其抗氧化作用的研究 【Ｊ】．时珍国医国药，２０１０，２１（１）：３５—３６ 【５ 杜瑞芳，５１王雨梅，刘卫东，等．高效液相色谱法同时测定沙枣中槲 皮素和异鼠李素的含量【Ｊ】．时珍国医国药，２００８，１９（４）：８３１－８３２ ［６］刘娟，杨艳丽．ＨＰＬＣ法测定沙棘不同部位槲皮素和异鼠李素的 含量ｆＪ１＇辽宁中医药大学学报，２０１０，１２（＠１６—１７ 收稿日期：２０１２—０６—１８