含pET30a质粒的大肠杆菌扩大培养时抗生素的加入量？？
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首先要进行菌种活化，可以先从保存的菌种液中吸5ul，接种到加入了相应抗生素的5ml LB培养基中，200转每分钟，37摄氏度过夜。
然后根据需要，如果要扩大培养，就按1:100的比例接种到大瓶的LB培养基（加抗生素）中，37°C 200转每分钟。然后你需要诱导啊什么的就等它的OD600到0.8-1.0左右进行就可。一般这个时间在4-6小时左右。
如果是为了抽提质粒，小抽5ml就可以，高拷贝质粒一般可以抽到10-40ug。大抽的话就用扩大培养的菌液进行抽提就好。
如果说菌种有老化的现象，活力不高，那么就在5ml培养结束后取100ul涂平板，12h后挑生长旺盛的单克隆再进入5ml LB 培养基中培养。
希望能够帮到你~有问题一起讨论解决哦~
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划板后摇瓶扩大培养
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解冻。
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画线或者直接摇菌。。。。
